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elisa試劑盒白介素類遊離的抗體則不同
更新時間:2017-12-13   點擊次數:954次

中常用的酶一般都用此法交聯。它具有操作簡便、有效(結合率達60%-70%)和重複性好等優(you) 點。缺點是交聯反應是隨機的,酶與(yu) 抗體(ti) 交聯時分子間的比例不嚴(yan) 格,結合物的大小也不均一,酶與(yu) 酶,抗體(ti) 與(yu) 抗體(ti) 之間也有可能交聯,影響效果。諏講椒ㄖ校?br> 先將酶與(yu) 戊二醛作用,透析除去多餘(yu) 的戊二醛後,再與(yu) 抗體(ti) 作用而形成酶標抗體(ti) 。xl18luck新利也可先將抗體(ti) 與(yu) 戊二醛作用,再與(yu) 酶聯結。兩(liang) 步法的產(chan) 物中絕大部分的酶與(yu) 蛋白質是以1:1的比例結合的,較一步法的酶結合物更有助於(yu) 本底的改善以提高敏感度,但其偶聯的有效率較一步法低。 
      過碘酸鹽氧化法:本法隻適用於(yu) 含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標記常用此法。反應時,過碘酸鈉將HRP分子表麵的多糖氧化為(wei) 醛基很活潑,可與(yu) 蛋白質上的氨基形成Schiff氏堿而結合。酶標記物按克分子比例聯結,其比例為(wei) :酶/抗體(ti) =1-2/1。此法簡便有效,一般認為(wei) 是HRPzui可取的標記方法,但也有人認為(wei) 所有試劑較為(wei) 強烈,各批實驗結果不易重演。 按以上方法製備的酶結合物一般都混有未結合物的酶和。理論上,結合物中混有的遊離酶一般不影響ELISA中zui後的酶活性測定,因經過*洗滌,遊離酶可被除去,並不影響zui終的顯色。但遊離的抗體(ti) 則不同,它會(hui) 與(yu) 酶標抗體(ti) 競爭(zheng) 相應的固相抗原,從(cong) 而減少了結合到固相上的酶標抗體(ti) 的量。
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