在中正確的洗滌是保證得到可重複結果的關(guan) 健一步,應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作,得出不正確的結果常與(yu) 不正確的洗滌有關(guan) ,ELISA就是靠洗滌來達到分離遊離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與(yu) 固體(ti) 抗原或抗體(ti) 結合的物質,以及在反應過程中非特異性吸附於(yu) 固相載體(ti) 的幹擾物質。
每種試劑都有其*反應模式,其中溫度和溫育時間控製是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會(hui) 造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為(wei) 避免蒸發,板上應加蓋。
作為(wei) 記錄測定結果的儀(yi) 器,酶標儀(yi) 的性能穩定與(yu) 否,決(jue) 定結果的可靠度。首先酶標儀(yi) 應定期進行保養(yang) ,對濾光片要定期校正;其次酶標儀(yi) 波長設置要正確,使用雙波長,一個(ge) 檢測波長,一個(ge) 參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液麵高度差異造成的光幹擾。此外,在用酶標儀(yi) 讀數時先擦試微孔板底部並壓平板條。由於(yu) 各種酶標儀(yi) 性能有所不同,使用中應詳細閱讀說明書(shu)
綜上所述,盡管目前上以及我國有了部分標準血清或參比血清(血清盤),但是酶聯免疫吸附技術目前在技術上尚未做到標準化。受方法學及技術條件的限製,在酶聯免疫吸附測定中有時不可避免的會(hui) 出現一定的非特異性,我們(men) 可以通過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底,從(cong) 而提高檢測的特異性,並得到更準確、可靠的實驗結果。
在基因治療中,造血幹細胞因為(wei) 具有自我更新及分化為(wei) 各種細胞係的能力而成為(wei) 一種很有吸引力的靶細胞。近年來,將外源目的基因導入造血幹細胞,以糾正或補償(chang) 基因缺陷和異常引起的疾病,特別是血液疾病如腺苷脫氨酶缺陷病、血友病、地中海貧血症及鐮狀細胞貧血症中已取得重要的進展,然而,在造血幹細胞中實現靶向基因組編輯卻仍然是一個(ge) 難題。
基因治療為(wei) 一些因基因缺陷引起的遺傳(chuan) 性疾病提供了良好的治療效果。然而傳(chuan) 統的方法是采用一種遺傳(chuan) 工程載體(ti) 將突變基因的一個(ge) 功能拷貝傳(chuan) 送到病變細胞添加到基因組中。盡管更為(wei) 先進的載體(ti) ,例如慢病毒載體(ti) 證實提高了安全性和療效,利用半隨機插入載體(ti) 存在的插入突變及失控性轉基因表達風險仍然令人們(men) 感到擔憂。這些不良效應有可能會(hui) 觸發癌症形成、毒性作用或破壞基因修飾細胞。