產(chan) 品及特點 本產(chan) 品是天澤基因自主開發的，專(zhuan) 門從(cong) 全血樣品中快速提取總RNA的試劑盒，主要用於(yu) 提取全血細胞的總RNA（提取血漿病毒RNA需使用病毒RNAout， 提取純化後的白細胞RNA可使用動物RNAout）。本產(chan) 品經過天澤基因科技人員精心優(you) 化而得，多項指標超過國內(nei) 外同類產(chan) 品。
1. RNA無明顯降解和DNA汙染， OD260/280均在1.9以上。血液RNA的產(chan) 量與(yu) 動物種類和動物的狀態（如有疾病與(yu) 否）有很大關(guan) 係，人全血產(chan) 量為(wei) 2-6 μg/mL，兔全血產(chan) 量為(wei) 5-10 μg/mL。
2. 操作簡單，直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品，不需裂解紅細胞等任何預處理步驟，整個(ge) 提取過程隻需要十多分鍾，可以全在室溫下進行。
3. 處理量大，每管的樣品處理量可以達到1.5 mL，高於(yu) 進口的同類產(chan) 品。
4. 與(yu) 常用的抗凝劑（包括肝素，EDTA，檸檬酸鈉，草酸鈉）兼容，得到的RNA可以直接用於(yu) RT-PCR和Northern雜交等研究。
規格及成分 成份 50次包裝 250次包裝
溶液A 50 mL 250 mL
溶液B 15 mL 75 mL
溶液C 25 mL 125 mL
溶液D 25 mL 125 mL
使用手冊(ce) 1份 1份

運輸及保存 常溫運輸，4℃保存，溶液B和溶液C有腐蝕性。4℃保存的溶液A可能會(hui) 產(chan) 生白色沉澱，用前需65℃水浴加熱直到沉澱溶解。有效期一年。
自備試劑 氯仿，異丙醇，75%乙醇，RNA溶解液（如液相RNase清除劑）。
使用方法 1. 將0.2-1.5 mL新鮮或解凍後的抗凝全血加入到1.5 mL塑料離心管中， 15000 g室溫離心3分鍾，棄上清（血漿）。如果此時血液細胞沉澱體(ti) 積大於(yu) 0.2 mL， 則需要減少血液的使用量，具體(ti) 減少量需根據具體(ti) 情況決(jue) 定，因為(wei) 各個(ge) 個(ge) 體(ti) （尤其是患者）血液中白細胞數目差別很大。如果提取 0.1 mL以下的微量血液樣品加入天澤基因的微量助沉劑RNADOWN。
2. 將1 mL溶液A加入到血液細胞沉澱中，用移液槍吹打沉澱使細胞裂解。
3. 將0.3 mL的溶液B和0.2 mL氯仿加入離心管，劇烈震蕩30秒。
4. 13000-15000 g室溫離心5分鍾，將上清液（為(wei) 無色或淺紅色，約0.5-0.9 mL）轉移到另一幹淨離心管中。為(wei) 防止汙染，留100 uL左右的上清液。下層有機相一般呈深紅色，中間層為(wei) 白色，含有DNA，蛋白質和其他細胞破碎物，避免觸及或吸取。
5. 加入0.5 mL的溶液C和0.2 mL的氯仿到上清液中，用手上下劇烈搖晃30秒。
6. 13000-15000 g室溫離心3分鍾，將上清液（無色，約1 mL）轉移到另一幹淨離心管中，避免觸及或吸取有機相及其上麵的白色膜狀物（蛋白質）。可以按每次吸取100-200 uL的方式分批轉移。
7. 在上清液中加入1/2體(ti) 積的溶液D，用手上下劇烈搖晃30秒，溶液將呈白色渾濁狀。
8. 13000-15000 g室溫離心5-30分鍾，小心移棄上清液，避免觸及管底大量的白色RNA沉澱。
9. 在離心管中加入1 mL 75%乙醇，振蕩器上振蕩混均30秒。室溫離心13000-15000 g 1分鍾，RNA此時在管底形成細小沉澱。小心吸棄上清液，注意不要吸棄RNA沉澱。
10. 重複第9步的75%乙醇清洗步驟一次。
11. 短暫快速離心數秒使管壁上殘留液體(ti) 沉到管底（約50 uL），用移液槍小心吸棄，注意不要吸棄沉澱。此步十分重要，因為(wei) 殘留的乙醇會(hui) 影響後續反應。
12. 室溫短暫放置2分鍾，立即加入適量（一般為(wei) 10-30 μL）溶解液使RNA沉澱溶解。建議使用具有滅活殘留RNase功能的新型RNA溶解液液相RNase Erasol而不要使用經典的DEPC水。千萬(wan) 不要用真空離心法使RNA沉澱過於(yu) 幹燥，否則RNA將變得十分難溶。RNA樣品可以直接使用，也可以存放於(yu) -80℃長期保存。