1.包被抗原的挑選
包被抗原可分為(wei) 天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。天然蛋白需經純化才能用直接吸附法包被,關(guan) 於(yu) 含雜質較多的抗原能夠選用直接捕獲法包被(先用能夠與(yu) 意圖抗原反響的物質如抗體(ti) 直接吸附在酶標板上,再經過特異性反響使抗原固相化)。經純化的重組蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比方多肽以及一些小分子有機化合物,由於(yu) 分子量太小,往往難於(yu) 直接吸附在酶標板上,一般都先使其與(yu) 無關(guan) 蛋白質如BSA等偶聯,偶聯物吸附於(yu) 固相載體(ti) 上。
2.包被液的挑選
一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩衝(chong) 液,假如包被的抗原在堿性條件下不穩定的話,也能夠運用pH7.2的磷酸鹽緩衝(chong) 液。
3.包被溫度的挑選
通常是4-8度條件下24小時後或許37度保溫2小時,咱們(men) 強烈建議4-8度條件下包被,有利於(yu) 蛋白活性的保持。