測定的標本十分廣泛,體(ti) 液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體(ti) 或抗原成份。xl18luck新利有些標本可直接進行測定(如血清 、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。這些標本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
按試劑盒說明書(shu) 的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾 水或去離子水,包括用於(yu) 洗滌的,應為(wei) 新鮮的和高質量的。自配的緩衝(chong) 液應用pH計測量較正。從(cong) 冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與(yu) 室溫平衡後使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。
的配製:對於(yu) 每種細胞因子應仔細閱讀說明書(shu) ,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書(shu) 中的細節,將凍幹的細胞因子複溶。 一般待測抗原標準曲線的線性範圍的可通過將標準品做8次2倍係列稀釋從(cong) 2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物係統可在一定範圍內(nei) 提高靈敏度。為(wei) 了優(you) 化靈敏度,建議孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為(wei) 顯色係統,應嚴(yan) 禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑製過氧化物xl18luck新利酶的活性。
的操作因固相載體(ti) 的形成不同而有所差異,國內(nei) 醫學檢驗一般均用板式點。本文將敘述板式ELISA各個(ge) 操作步驟的注意要點,ELISA檢測試劑盒珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與(yu) 特殊儀(yi) 器配合應用。